Infección cervical por virus del papiloma humano: genotipificación por hibridación in situ y análisis ultraestructural por microscopia electrónica de transmisión

INTRODUCCIÓN: El virus del papiloma humano (VPH) es el virus que más frecuentemente se transmite por contacto sexual y está fuertemente asociado con el cáncer cérvicouterino. Los tipos virales que se documentan con mayor frecuencia en el epitelio cervical son 6, 11, 16, 18, 31 y 33, los cuales difieren en su capacidad oncogénica; los dos primeros presentan bajo potencial y los últimos alto potencial oncogénico. Objetivo: Identificar los tipos de VPH presentes en biopsias de cervix con evidencia citológica, colposcópica e histopatológica de infección viral, y realizar un análisis ultraestructural de los cambios celulares asociados. Material y métodos: Usamos la hibridación in situ (HIS) con sondas biotiniladas para identificar los tipos virales, y las biopsias positivas se procesaron para análisis ultraestructural por microscopia electrónica. Resultados: Se analizaron por HIS 63 biopsias cervicales, 24 (38%) resultaron positivas para alguno de los tipos virales probados, los más frecuentes fueron los tipos 6/11 (24%), los cuales en el análisis ultraestructural se asociaron a la presencia de varios nucléolos en núcleos con bordes crenados, en tanto que los tipos oncogénicos se asociaron con la presencia de partículas virales en núcleos, que frecuentemente se presentan multilobulados y con inclusiones citoplasmáticas. En ambos casos es evidente la desorganización de los desmosomas. Conclusiones: La prevalencia de VPH encontrada en este estudio concuerda con lo reportado para esta infección viral en otros estudios donde se usa la misma técnica, los tipos virales concuerdan con el diagnóstico inicial, y el estudio ultraestructural arroja evidencias sobre las principales alteraciones celulares asociadas a la infección viral.

Introduction: Human papillomavirus (HPV) is the most common sexually transmitted virus, is strongly associated with cervical cancer. HPV genital types differs in oncogenic potential, types 6/11 are low-risk and, types 16/18, 31/33 are high-risk. In situ Hybridization (ISH) analysis has advantage of being able to detect both, the specific cellular types infected with viral DNA and the HPV types in cervical biopsies and therefore, cervical cancer patient's risk. Objective: This work was performed in order to typing HPV in cervical biopsies with cytological, colposcopical and histopathological evidence of HPV infection, and to search ultrastructural changes associates with viral infection. Results: We analyzed, by ISH, 63 cervical biopsies, 24 (38%) positives to some viral type, HPV types 6/11 were more common types (24%) consistent with the more frequent, both colposcopical and histopathological diagnostic; Low-grade intraepithelial lesion. Ultraestructural analysis showed cellular alteration in association with low-risk types, principally irregular nucleus and several nucleolus for nucleus, as long as cells infected with oncogenic types DNA showed multilobulated nucleus, cytoplasmic inclusions and viral particles in nucleus. In both cases is clear an disorganization of cellular junctions desmosomes. Conclusions: The HPV prevalence in this study was consistent with other reported, using ISH analysis, the more common types were low-risk types in agreement with previous diagnostic, and electron microscopy analysis provide evidence on the main cell alterations associated with viral infection.

Análisis ultraestructural de placentas con villitis. Estudio retrospectivo / Ultrastructural analysis of villitis placentae. a retrospective study

La villitis es una inflamación crónica focal o multifocal de las vellocidades coriónicas con infiltración de células mononucleares y áreas de necrosis fibrinoide la cual puede ser producida por infección viral (VIV) o bien puede ser de etiología desconocida (VED). En el presente estudio se realizó un examen morfológico a nivel ultraestructural de 11 placentas con diagnóstico de villitis con el objetivo de establecer una comparación de tipo descriptivo entre las VIV y las VED. Las biopsias fueron procesadas con las técnicas convencionales para microscopía óptica y electrónica. Las observaciones ultraestructurales permitieron confirmar la presencia de partículas virales en cuatro casos, mientras que en los restantes siete no se detectó ningún tipo de virus. Se notó ausencia o disminución focal en las microvellosidades lo cual estuvo asociado con la presencia de necrosis fibrinoide en el estroma y clínicamente a cuatro partos pretérmino y un óbito. En ambos tipos de villitis se encontraron alteraciones en el trofoblasto como engrosamiento de la membrana basal asociado con depósito de material electrodenso similar a calcio; también se observó vacuolización y edema en el estroma de las vellosidades. En algunos casos se notó la presencia de depósitos focales de fibrina asociado con zonas de necrosis en el estroma, precipitados de calcio y cuerpos mielínicos en el sinciotrofoblasto. En los casos de infección viral (dos por CMV y dos positivos para TORCH) los vasos fetales mostraron obliteración y/o trombos. En estos casos se detectaron partículas virales con incremento de las células de Hofbauer y calcificaciones en la membrana basal. En conclusión podemos decir que en ambos tipos de villitis existe una reacción inmunológica que produce la pérdida o disminución de las microvellosidades del trofoblasto con infiltración de células mononucleares y edema. Estas alteraciones reducen importantemente el intercambio materno-fetal de gases, nutrientes, hormonas etc., lo cual puede ser la causa del retraso en el crecimiento, la inmadurez o la muerte del feto

La microscopía electrónica en el diagnóstico de enfermedades infecciosas de transmisión sexual: experiencia institucional / Diagnosis by electronic micrography of sexually transmited diseases. An institutional experience

Se informa los resultados, de seis estudios de enfermedades de transmisión sexual (STD) que se han hecho en nuestra Institución. En infecciones por el citomegalovirus, el diagnóstico por microscopía electrónica se puede efectuar en menos de media hora a través de la tinción negativa (PTA). En casos de mujeres embarazadas y seropositivas para VIH, fue posible demostrar partículas semejantes a virus de VIH en diferentes niveles dentro del tejido placentario. En los núcleos de celulas del epitelio cervical se observaron partículas virales semejantes a papilomavirus. En este estudio se confirmó que los Mycoplasmas pueden adherirse o penetrar en los espermatozoides. También se muestra que la Chlamydia trachomatis puede llevar a cabo su ciclo vital en el interior de células espermáticas. Finalmente, material fotográfico es presentado para mostrar los mecanismos de invasión de la Gardnerella vaginalis en células epiteliales vaginales

Efecto protector de la albúmina sobre las membranas del espermatozoide humano en la capacitación espermática in vitro / Albumin protective effect on human spermatozoa membranes during in vitro sperm capacitation

Se estudió el efecto de la preparación in vitro de semen sobre la estructura y sobrevida del espermatozoide humano, con el objeto de valuar si la albúmina protege las membranas durante la centrifugación. Se analizaron de manera cegada y aleatoria 12 muestras seminales de hombres fértiles a las cuales se les trató por tres métodos diferentes (swim-up, gradientes de albúmina, gradientes de percoll), para separar la fracción móvil de espermatozoides. Las membranas plasmática y acrosomal externa y la sustancia acrosomal de los espermatozoides fueron observadas al microscopio electrónico de transmisión en 50 espermatozoides por muestra y la viabilidad y movilidad progresiva se analizó después de incubación durante 24 horas a 37ºC. Se presenta evidencia que sugiere que la albúmina estabiliza la membrana acrosomal externa del espermatozoide humano e incrementa la viabilidad de esta célula

Cambios en la reserva hipofisiaria de gonadotropinas en relación al daño testicular / Gonadotrophy hypophisiary storage changes in relation to the testicular damage

Con el objeto de estudiar la correlación morfo-funcional del eje hipotálamo-hipófisis-testículo en el humano, se estudiaron 20 pacientes con azoospermia, volumen testicular normal y concentraciones normales o discretamente elevadas de hormona folículoestimulante. En todos los casos se practicó biopsias testicular unilateral y determinaciones de hormona luteinizante (LH), hormona folículo estimulante (FSH), testosterona libre (TL) y estradiol (E), tanto en condiciones basales como su respuesta dinámica en una prueba de citrato de omifeno (CC:100 mg/día/7 días). Se observó un incremento progresivo de FSH en relación con la severidad del daño testicular (r=0.68; p<0.001). La respuesta de FSH al CC fué mayor que la de LH en los casos en que el índice FSH/LH era superior a 1.06. Estos datos confirman la existencia de un nivel fino de regulación de la gónada hacia el eje hipotálamo-hipófisis

Prevalencia del ateroma coronario microscópico en adultos jóvenes de la Ciudad de México / Prevalence of microscopic coronary atheroma in young male inhabitants of Mexico City

Se estudió la prevalencia de la ateromatosis microscópica en la porción proximal de la arteria coronaria descendente anterior en 38 sujetos masculinos entre los 20 y los 29 años de edad, muertos accidentalmente y representativos de la clase socioeconómica mayoritaria de la ciudad de México. En 11 (33%) existía ateroma coronario con grados variables de obstrucción luminal, siendo en dos de ellos mayor del 75%. Esta prevalencia es superior a la observada por nosotros en sujetos más jóvenes del mismo nivel socio-económico y es menor y con lesiones menos importantes, que la encontrada en sujetos mayores de 40 años. Estos resultados sugieren, que al igual que en algunas otras partes del mundo, en la ciudad de México un número importante de varones, con bajo nivel socioeconómico, desarrolla aterosclerosis coronaria en la tercera década de la vida. Estos resultados pudieran poner en duda conceptos tenidos hasta ahora en nuestro medio de la relación entre el estado socioeconómico y la prevalencia de aterosclerosis coronaria